Le diagnostic sérologique de la maladie de Lyme :
ELISA ET WESTERN BLOT

Le diagnostic d’une maladie de Lyme repose à la fois sur l’historique du patient, les signes cliniques, la réponse aux antibiotiques et les examens de biologie médicale réalisés au laboratoire.

Au niveau biologique, il existe deux types de recherche :

1/ L’identification directe de la bactérie : examen direct, culture, PCR ( Polymérase Chain Reaction ).
Les méthodes d’identification directe
L’observation microscopique pourrait, dans certains cas, identifier des spirochètes mais rien ne permettrait d’affirmer qu’il s’agit de b. burgdorferi. Une coloration argentique ou une coloration par immunofluorescence directe peuvent être réalisées. Leurs sensibilité et spécificité sont faibles.
La culture des borrélies : elle est lente et difficile et ne peut s’imposer dans un contexte d’infection active.
La méthode PCR : Une recherche d’ADN de Borrelia par amplification génique (méthode PCR) peut être proposée aux patients avec des symptômes persistants et une sérologie négative. Sa spécificité est proche de 100 % mais la sensibilité est très variable selon les prélèvements effectués. Ainsi dans le cadre des maladies de Lyme avérées, elle ne serait positive que dans moins de 30 % des cas, donc insuffisante pour poser un diagnostic de maladie de Lyme.

2/ La recherche indirecte des anticorps dirigés contre la borrelia : tests de détection sérologique
Les méthodes de recherche indirecte : Les tests de détection sérologique (recherche des anticorps dirigés contre la borrelia)
Le plus souvent, le médecin sollicite une recherche indirecte. Dans ce cas, on recherche les anticorps dirigés contre les bactéries. Les anticorps sont des protéines ( immunoglobulines ) qui sont produites lorsque des cellules du système immunitaire rencontrent des protéines ou d’autres molécules appelées antigènes.
Deux types de techniques sont actuellement utilisés : les tests quantitatifs de dépistage ELISA et les tests qualitatifs de confirmation, Western Blot

 

Les tests quantitatifs de dépistage de type ELISA :
Le principe des tests quantitatifs de dépistage repose sur une technique de type ELISA.
Pour la détection de la borréliose, les méthodes enzymatiques de détection sont celles qui sont utilisées de nos jours. Certains tests permettent le dosage sur liquide céphalo-rachidien (LCR) et le sang total.
Les limites du test ELISA : Ce test est un test « global » qui donne une réponse quantitative de l’ensemble des anticorps IgG ou IgM retrouvés dans le sang.
Les tests ELISA utilisés en France montrent souvent un défaut tant au niveau de la spécificité que de la sensibilité.
Le laboratoire Lavergne utilise le test Lyme ELISA BIOMERIEUX.
Juste après la morsure d’une tique et confirmation d’une contamination, les tests ELISA sont souvent inutiles car la sérologie est souvent négative, ou alors elle va témoigner d’un contact ancien avec une bactérie. La sérologie ELISA devient positive après 3 à 4 semaines.

Les tests qualitatifs de confirmation (WESTERN BLOT) :
Le Lyme Western-Blot

Si le test ELISA est positif, le médecin demande une recherche par immuno-empreinte ( Lyme Western Blot – WB ).
Le Lyme Western Blot – WB est plus fiable que le test ELISA car plus spécifique.
C’est un test qualitatif qui permet de détecter sur une bandelette de nitrocellulose les différents types d’anticorps IgG ou IgM ce qui permet de distinguer un test positif d’un « faux – positif » ( test qui apparaît positif en ELISA mais qui ne correspond pas à une infection par Borrelia ).
De plus, le Lyme Western Blot – WB permet de distinguer les différents types de Borelliose :
Borrelia burgdoferi
Borrelia burgdoferi sensu lato garinii
Borrelia burgdoferi sensu lato bavariensis
Borrelia burgdoferi sensu lato sensu stricto
Borrelia burgdoferi sensu lato afzelii
Borrelia burgdoferi sensu lato spielmanii

Le laboratoire Lavergne utilise la technique du test Lyme WESTERN BLOT WB ALL DIAG MIKROGEN LYMECHECK IGG ET IGM de la société Biosynex qui détecte les protéines suivantes :
La protéine p100
La protéine p58
La protéine p39
La protéine OspC
La protéine Vise
La protéine p41
La protéine OspA
La protéine p18

Le profil complet donné par le test Lyme WESTERN BLOT WB ALL DIAG MIKROGEN permet un diagnostic qualitatif et un diagnostic de l’évolutivité de l’éventuelle infection.
Le test Lyme WESTERN BLOT WB ALL DIAG MIKROGEN permet de dépister surtout les sous espèces européennes de borrélioses.

Répartition géographique et tropisme des différentes espèces

B. Sensu stricto Prévalence décroissante d’Ouest en Est Atteintes articulaires
LB. Garinii Prévalence décroissante d’Ouest en Est Atteintes neurologiques
B. Afzelii Pays de l’Est et prédominant en Suisse Atteintes dermatologiques
B. Spielmanii Allemagne, Hongrie, France (Camargue Alsacienne) Tchéquie
B. Valaisiania Irlande, GB, Allemagne, Autriche, Suisse
B. Lusitaniae Portugal

Exemple d’une bandelette Lyme western blot LYMECHECK ALL DIAG MIKROGEN :

LA PRISE EN CHARGE DES TESTS SEROLOGIQUES PAR L’ASSURANCE MALADIE

Le test Elisa est pris en charge par l’assurance maladie et les complémentaires santé (mutuelles) sur la base de 60 % – 40 %.

Quand celui-ci est positif, le test Lyme WESTERN BLOT WB est lui aussi pris en charge sur la même base.

Quand le test Elisa est négatif en IgG et IgM, le test Lyme WESTERN BLOT WB n’est pas pris en charge.

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